АНТИВИРУСНАЯ И ИНТЕРФЕРОНИНДУЦИРУЮЩАЯ АКТИВНОСТЬ НОВЫХ СОЕДИНЕНИЙ – ПРОИЗВОДНЫХ ИНДОЛХИНОКСАЛИНОВ /Т.А. Богун, Л.Г. Жолнер, Т.И. Быкова, Н.М. Жолобак, Н.Я. Спивак - К.: Научные вести НТУУ "КПИ". 2016, № 3. С.
Проблематика. Разработка новых препаратов с антивирусной активностью и способностью индуцировать интерферон является актуальной задачей с учетом стремительного распространения вирусных инфекций, формирования резистентных к существующим антивирусным препаратам штаммов вирусов, общего снижения иммунного ответа.
Цель исследования. Определение антивирусной и интерфероногенной активности производных индолохиноксалинов в условиях in vitro.
Методика реализации. В работе на культурах клеток ST в условиях in vitro изучали противовирусное и интерферониндуцирующее действие 18 новых новосинтезированных соединений – производных индолохиноксалинов
Результаты исследования. Показана способность исследуемых веществ подавлять развитие вирусного цитопатического эффекта на модели ST-BBC только при лечебной схеме введения. На модели перевиваемых культур клеток ST показано, что 12 из 18 исследованных соединений вызывают индукцию ИФН в достаточно низких концентрациях.
Выводы. Среди исследованных соединений производных индолохиноксалина как перспективное для дальнейших исследований определено соединение RG-61, которое проявляет низкую токсичность (по сравнению с соединениями ряда производных) и антивирусную активность в инфицированных клетках, а также индуцирует ИФН.
Ключевые слова: индукторы интерферона; антивирусная активность; вирус везикулярного стоматита; интерферониндуцирующее действие; амиксин; производные индолохиноксалинов.
Получение водорода при анаэробной ферментации отходов кукурузы и подсолнуха /Н.Б. Голуб, Д.И. Драпой - К.: Научные вести НТУУ "КПИ". 2016, № 3. С.
Проблематика. Получение водорода – альтернативного энергоносителя из возобновляемого сырья (сельскохозяйственных отходов).
Цель исследования. Установление рациональных параметров предварительной щелочной обработки отходов подсолнуха и кукурузы для повышения скорости продуцирования водорода ассоциацией микроорганизмов.
Методика реализации. Для определения качественного и количественного состава биогаза, который образуется в процессе ферментации, использовали метод газовой хроматографии. Для определения зон лизиса и контроля видового состава ассоциации микроорганизмов использовали методы световой микроскопии.
Результаты исследования. Определено влияние 5, 10, 20, 30, 40 %-ной концентрации щелочи при предварительной обработке отходов кукурузы и подсолнуха на выход водорода в процессе анаэробной ферментации в течение 1, 2 и 3 ч. Максимальный выход водорода наблюдается при обработке 20 %-ным раствором NaOH в течение 3 ч. Исследован выход водорода в процессе ферментации при соотношении по объему инокулята и культуральной среды (0,0267 г в 1 см3) 1:6; 1:3; 1:2; 2:3; 1:1. Содержание микроорганизмов в суспензии инокулята 0,0011 г/см3. Показано, что при использовании ассоциации, обогащенной микроорганизмами родов Clostridium и Bacillus, выход водорода в газовой фазе достигает 87,5 ± 4,2 % при соотношении инокулята и культуральной среды 2:3. Исследован процесс ферментации при двух температурных режимах: 22 ± 2 и 35 ± 2 °C. Показано, что повышение температуры с 22 ± 2 до 35 ± 2 °C позволяет увеличить выход водорода в 2 раза. Показано, что максимальный выход водорода наблюдается при проведении ферментативного процесса при рН 6–6,5. Снижение рН вызывает изменение метаболических путей с ацетатного типа брожения в сторону образования бутирата, что приводит к снижению выхода водорода.
Выводы. Наиболее эффективным методом предварительной обработки субстрата для процесса получения водорода при анаэробной ферментации отходов кукурузы и подсолнуха (1:1) является обработка 20 %-ным раствором NaOH в течение 3 ч. Максимальный выход водорода наблюдается при соотношении инокулята и культуральной среды 2:3 при значениях рН 6–6,5 и температуре 35 ± 2 °C.
Ключевые слова: анаэробная ферментация; водород; отходы; микроорганизмы; инокулят; субстрат; целюлозосодержащее сырье.
БИОБЕЗОПАСНОСТЬ В КОНТЕКСТЕ ОХРАНЫ ТРУДА. БИОТЕХНОЛОГИЧЕСКИЙ И НОРМАТИВНО-ПРАВОВОЙ АСПЕКТЫ /В.В. Данилова, Н.В. Дехтяренко, Ю.В. Горшунов, А.Ю. Галкин - К.: Научные вести НТУУ "КПИ". 2016, № 3. С.
Проблематика. Стремительное распространение современных биотехнологий вызывает обеспокоенность общественности относительно их потенциального вредного воздействия на биологическое разнообразие, а также относительно рисков для здоровья человека. Одним из важных аспектов реализации требований биобезопасности является соблюдение правил охраны труда.
Цель исследования. Анализ современного состояния обеспечения биобезопасности через реализацию требований к охране труда на предприятиях и в научно-исследовательских учреждениях биотехнологического (фармацевтического) профиля.
Методика реализации. Проведены анализ и обобщение информации о биотехнологических и нормативно-правовых аспектах биобезопасности и охраны труда.
Результаты исследования. Принцип биологической безопасности – это ограничение распространения или предотвращение утечки инфекционного материала из лабораторной среды, где с ним проводят различные манипуляции или поддерживают в культуре. Основные нормативно-правовые документы, регулирующие сферу охраны труда при работе с БО в Украине: законы “Об обеспечении санитарного и эпидемического благополучия населения”, “О государственной системе биобезопасности при создании, испытании, транспортировке и использовании генетически модифицированных организмов”, Государственные санитарные нормы и правила “Организация работы лабораторий при исследовании материала, который содержит биологические патогенные агенты I–IV групп патогенности молекулярно-генетическими методами”, Государственные санитарные правила “Безопасность работы с микроорганизмами І–ІІ групп патогенности”.
Выводы. Важным элементом доступа продукции биотехнологической отрасли Украины на рынки развитых стран является соблюдение международных рекомендаций по биобезопасности, что невозможно без имплементации соответствующих международных документов в отечественное законодательство. Формированию системного подхода в области биобезопасности и охраны труда на предприятиях и в научно-исследовательских учреждениях биотехнологического профиля будет способствовать разработка и внедрение правил (лицензионных условий) осуществления деятельности с генетически модифицированными организмами.
Ключевые слова: биобезопасность; охрана труда; биологические объекты; риски.
ПОДБОР МЕТОДОВ ЭКСТРАКЦИИ КАРОТИНОИДОВ ИЗ ГЛУБИННОГО МИЦЕЛИЯ LAETIPORUS SULPHUREUS /Л.П. Дзыгун, О.А. Палюшок, О.М. Чуднивец - К.: Научные вести НТУУ "КПИ". 2016, № 3. С.
Проблематика. Получение природных каротиноидов для их практического применения. Ксантокаротин, полученный биотехнологическим путем, может быть использован в легкой промышленности в качестве альтернативы искусственным пигментам. Потребность в выделении природных каротиноидов также обусловлена их пригодностью для медицинского применения, поскольку данные вещества обладают различной биологической активностью (противоопухолевой, радиопротекторной, антимикробной, противовирусной, антиоксидантной).
Цель исследования. Целью работы является подбор способа и условий для эффективного извлечения каротиноидов из биомассы Laetiporus sulphureus.
Методики реализации. По завершении глубинного культивирования продуцента проводили экстракцию пигментов различными методами и определяли содержание каротиноидов.
Результаты исследования. Выбрана эффективная схема экстракции, которая позволяет достаточно полно выделить каротиноидные соединения, и рассчитано содержание каротиноидных веществ в биомассе продуцента.
Выводы. Определен оптимальный способ экстрагирования – этанол-гексановый. Установлено, что с повышением температуры выдержки экстракта меняется состав ключевой фракции вещества.
Ключевые слова: каротиноиды; ксантокаротин; экстракция; оптическая плотность; глубинное культивирование; Laetiporus sulphureus.
Биогенные рамнолипидные ПАВ в комплексных регуляторах роста растений /И.В. Карпенко, Г.Г. Мидяна, Е.В. Карпенко - К.: Научные вести НТУУ "КПИ". 2016, № 3. С.
Проблематика. Актуальной проблемой биотехнологии является создание экологически безопасных препаратов для растениеводства. С учетом экологической угрозы синтетических средств приоритетными являются биологические продукты для растений. Среди них заслуживают внимания биогенные поверхностно-активные вещества (биоПАВ), что связано с их физико-химическими и биологическими свойствами.
Цель исследования. Влияние поверхностно-активных продуктов микробного синтеза штамма Pseudomonas sp. PS-17 (рамнолипидных биоПАВ) на активность фитогормонов для создания комплексных регуляторов роста растений.
Методика реализации. Влияние супернатанта культуральной жидкости (CКР) и рамнолипидного биокомплекса (РБК) на активность фитогормонов определяли в биотестах на ауксины, цитокинины, гиббереллины.
Результаты исследования. Показано, что в композициях РБК с фитогормонами повышается их активность: ауксинов – на 28 % (индолил-3-уксусная кислота) и 63 % (индолил-3-масляная кислота); гиббереллинов – на 30 %, цитокининов – на 24–30 % (в сравнении с вариантами без ПАВ). Подобное стимулирующее влияние на фитогормоны установлено и для препарата СКР, кроме того, он проявлял фитогормоноподобное действие.
Выводы. Результаты доказывают перспективность рамнолипидных ПАВ для создания экологически безопасных комплексных регуляторов роста растений.
Ключевые слова: рамнолипидные ПАВ; колеоптиль; гипокотиль; цитокинин; гиббереллиновая кислота; ауксин.
Применение окислителей для интенсификации биологической составляющей процессов обезжелезивания и деманганации воды /А.В. Кравченко - К.: Научные вести НТУУ "КПИ". 2016, № 3. С.
Проблематика. Железо- и марганецсодержащие подземные воды встречаются практически во всех регионах Украины. Концентрация соответствующих элементов колеблется в очень широком диапазоне, и в некоторых регионах достигает 20–30 мг/дм3 для железа и 2–3 мг/дм3 для марганца. Высокое содержание в воде указанных соединений ухудшает ее органолептические показатели, приводит к образованию цветных пленок и осадков и, как следствие, к зарастанию водопроводных сетей, водозаборной арматуры, сантехнических изделий. Поэтому усовершенствование существующих или разработка новых технологий обезжелезивания и деманганации воды остается актуальным вопросом современности.
Цель исследования. Целью работы является проверка влияния окислителей – озона и перекиси водорода – на эффективность обезжелезивания и деманганации воды.
Методика реализации. Исследования проводились на лабораторных колонках, заполненных цеолитом Сокирницкого месторождения фракцией 1–4 мм. Колонки заселяли чистой культурой микроорганизмов р. Leptothrix, а также смешанными культурами микроорганизмов р. Leptothrix и р. Sphaerotillus. Через колонки пропускали модельные растворы разного состава, обрабатывали, соответственно, озоном (1 мг/дм3) и раствором перекиси водорода (1 мг/дм3).
Результаты исследования. Добавление окислителей в небольших концентрациях способствует интенсификации процесса обезжелезивания и деманганации чистыми и смешанными культурами железо- и марганецокисляющих бактерій (до 98 %). Полученные результаты подтверждают тот факт, что при удалении железа и марганца из воды интенсифицируется именно биологическая, а не физико-химическая составляющая процесса.
Выводы. Сделаны выводы относительно эффективности озонирования для обезжелезивания и деманганации воды. Показано значительное повышение эффективности удаления железа и марганца из растворов, обработанных озоном. Технологически данный процесс удобно реализовать путем предварительного озонирования перед фильтром с загрузкой, заселенной бактериями, способными окислять железо и марганец.
Ключевые слова: обезжелезивания; деманганация; озонирование; перекись водорода.
Методы оценки биологической активности рекомбинантного интерлейкина-7 человека и исследование стабильности препарата на его основе /Т.Н. Луценко, Д.Б. Старосила, С.Л. Рыбалко, А.Ю. Галкин - К.: Научные вести НТУУ "КПИ". 2016, № 3. С.
Проблематика. Интерлейкин-7 является одним из важнейших регуляторных цитокинов иммунной системы. Рекомбинантный интерлейкин-7 человека (рИЛ-7) в водных растворах подвергается механизмам химического разложения, таким как протеолиз, окисление, дисульфидный обмен, олигомеризация и т.д. Подобные изменения влияют на срок годности препарата на основе рИЛ-7. Оценку биологической активности рИЛ-7 можно проводить посредством оценки его противовирусной активности.
Цель исследования. Сравнение методов ингибирования репродукции вирусов гриппа, простого герпеса и гепатита С рекомбинантным интерлейкином-7 человека и исследование стабильности препарата на его основе.
Методика реализации. В работе использовали перевиваемые культуры клеток: почки собак, почки быка и почки африканской зеленой мартышки Vero. Использовали такие вирусы: суррогатный вирус гепатита С (вирус бычьей вирусной диареи (ВБВД)), вирус гриппа (штамм А/FM/1/47 (H1N1)), вирус простого герпеса 2 типа (ВПГ-2) (штамм ВН). Для определения антивирусной активности рИЛ-7 в условиях in vitro использовали суточную перевиваемую культуру клеток. Клетки выращивали на среде RPMI-1640.
Результаты исследования. Показано, что рИЛ-7 в буферных стабилизирующих растворах и культуральной среде через 1 неделю хранения был активным в разведении 0,003 мкг/мл против вируса ВБВД. По результатам исследований антивирусной активности препарата рИЛ-7 в буферных растворах и культуральной среде против вируса гриппа А/FM/H1N1 можно сделать вывод, что хранение препарата в буферных растворах и в интактном состоянии при температуре 4 °С в течение 1 недели не влияло на его антивирусную активность. Показано, что антигерпетическая активность препаратов через 1 неделю хранения при температуре 4 °С в буферных стабилизирующих растворах и интактном состоянии оставалась эффективной. Антивирусная активность препаратов в стабилизирующем растворе сохранялась в течение 3-х месяцев при температуре 4 °С, а в интактном состоянии рИЛ-7 терял свою антивирусную активность через 1 неделю в отношении вируса герпеса и через 1 месяц в отношении ВБВД.
Выводы. Разработаны методики оценки противовирусной активности рИЛ-7 по отношению к ВБВД, вирусу гриппа, а также ВПГ-2. Доказано, что предложенные нами буферные стабилизирующие растворы обеспечивают высокий уровень биологической активности препаратов рИЛ-7 при их хранении при температуре 4 °С в течение 3-х месяцев, что является предпосылкой для разработки на их основе жидких лекарственных форм фармацевтических препаратов.
Ключевые слова: интерлейкин-7 человека рекомбинантный; противовирусная активность; биологическая стандартизация.
Фермент пуллуланаза: анализ различных типов пуллуланаз, их продуцентов, отраслей использования /М.В. Молочко, Н.В. Дехтяренко - К.: Научные вести НТУУ "КПИ". 2016, № 3. С.
Проблематика. Работа посвящена критическому анализу литературы, охватывающей основные аспекты создания ферментных препаратов пуллуланазы.
Цель исследования. Целью работы является определение перспективных направлений исследований в области создания пуллуланазных ферментных препаратов.
Методика реализации. Проведены анализ и обобщение информации об отраслях использования, источниках получения, механизме действия, свойствах фермента пуллуланаза, а также о способах культивирования и методах выделения и очистки ферментного препарата, методах иммобилизации и способах определения активности фермента.
Результаты исследования. В результате анализа литературных источников определено существование большого количества лабораторных разработок получения фермента пуллуланаза и установлено, что его промышленное производство как в нашей стране, так и в странах ближнего зарубежья отсутствует.
Выводы. Определен перечень отраслей, в которых наблюдается успешное использование пуллуланазы. Проведен патентный поиск современных продуцентов пуллуланазы и определены особенности их культивирования. Установлены распространенные способы получения очищенной пуллуланазы и современные методы ее иммобилизации, а также способы определения активности пуллуланазы относительно субстрата пуллулан. Указан круг мировых производителей пуллуланазных ферментных препаратов.
Ключевые слова: пуллуланаза; фермент; промышленность; механизм действия; продуцент; свойство; активность; очистка; производители; штамм.
ВЛИЯНИЕ ОБЛУЧЕНИЯ СВЕТОМ СИНЕГО ДИАПАЗОНА СПЕКТРА НА ПОВЫШЕНИЕ УРОВНЯ ТРАНЗИЕНТНОГО НАКОПЛЕНИЯ РЕКОМБИНАНТНОГО РЕПОРТЕРНОГО БЕЛКА GFP В РАСТЕНИЯХ NICOTIANA BENTHAMIANA /А.А. Петерсон, М.Ю. Василенко, Ю.С. Прищепа, Л.Б. Орябинская, М.В. Кучук - К.: Научные вести НТУУ "КПИ". 2016, № 3. С.
Проблематика. Растительные экспрессионные системы все шире используются в научной и коммерческой биотехнологии. Исследование влияния различных факторов на эффективность растительных транзиентных экспрессионных систем расширяет научный базис для масштабного и экономически обоснованного использования этих систем в биотехнологическом производстве.
Цель исследования. Определение влияния облучения растений Nicotiana benthamiana синим светом непосредственно перед агроинфильтрацией на уровень транзиентного накопления рекомбинантного репортерного белка GFP.
Методика реализации. Облучение растений синим светом осуществлялось светодиодными светильниками (λ = 440 нм). Количество накопленного репортерного белка в листьях растений определяли флуорометрическим методом.
Результаты исследования. Продемонстрировано увеличение накопления GFP в биомассе облученных растений по отношению к накоплению этого белка в необлученных растениях. Увеличение уровня накопления находилось в пределах 60–87 % в зависимости от других условий агроинфильтрации.
Выводы. Продемонстрированный эффект выглядит перспективным в методическом плане как в лабораторной, так и в производственной практике в связи с тем, что аппаратное обеспечение для облучения является конструктивно простым, дешевым и энергоэффективным, а само облучение осуществляется на протяжении короткого времени.
Ключевые слова: растительная экспрессионная система; транзиентная экспрессия; Nicotiana benthamiana; рекомбинантный белок; зеленый флуоресцирующий протеин; GFP.
СОВРЕМЕННЫЕ ВОЗМОЖНОСТИ ПОЛУЧЕНИЯ ЭФИРНОГО МАСЛА С АРОМАТОМ РОЗЫ /В.Ю. Полищук, А.М. Дуган - К.: Научные вести НТУУ "КПИ". 2016, № 3. С.
Проблематика. Эфирное масло розы является одним из самых ценных эфирных масел, оно пользуется большим спросом и широко применяется в парфюмерно-косметической, пищевой и фармацевтической отраслях. Однако традиционные методы его производства имеют определенные недостатки, поэтому актуальными становятся биотехнологические методы получения эфирного масла с ароматом розы.
Цель исследования. Анализ современных литературных источников о возможности получения эфирного масла с ароматом розы традиционными и биотехнологическими способами, поиск наиболее перспективных микроорганизмов для дальнейших исследований.
Методика реализации. В работе осуществлены мониторинг и анализ отечественных и зарубежных литературных источников.
Результаты исследования. Рассмотрены традиционные методы получения розового эфирного масла, его свойства и применение. Обнаружены рода микроорганизмов, способные синтезировать душистые соединения, входящие в состав эфирного масла розы. Представители рода Eremothecium относятся к перспективным продуцентам, которые синтезируют как рибофлавин, так и компоненты розового эфирного масла (β-фенилэтанол, гераниол, цитронеллол и нерол).
Выводы.Экономическая целесообразность производства на основе Eremothecium может быть увеличена за счет комплексного получения рибофлавина и эфирного масла для удовлетворения потребностей в них медицинской, фармацевтической, парфюмерно-косметической и пищевой промышленности.
Ключевые слова: эфирное масло розы; грибы; синтез de novo; продуцент; Eremothecium.
Метанопродукция мезофильных бактериальных сообществ, выделенных из отходов животноводческих комплексов /Л.А. Хрокало, А.И. Доломан, В.Ю. Черненко - К.: Научные вести НТУУ "КПИ". 2016, № 3. С.
Проблематика. Рассмотрены перспективные субстраты для разработки биологических препаратов в технологиях получения биогаза.
Цель исследования. Целью работы было выделение из отходов животноводства (навоза свинофермы, куриного помета, ферментированных отходов) накопительных культур мезофильных анаэробных бактериальных сообществ, оценка их продуктивности по метану, выделение и идентификация культур метанобразующих бактерий.
Методика реализации. Культуры бактерий выращивали в анаеробных условиях на жидкой и агаризованной средах Жилиной с добавлением ацетата натрия при температуре +33 ± 2 oC. Состав газообразных метаболитов определяли на газовом хроматографе ЛХМ-8МД. Образцы культуры, отобранные в потоке аргона, фиксировали, окрашивали по Грамму и микроскопировали.
Результаты исследования. Все выделенные накопительные культуры достаточно эффективно продуцировали метан, на 12-е сутки культивирования во флаконах содержалось около 10–15 об. % метана. В конце эксперимента самые высокие показатели продукции метана (28 об. %) имели накопительные культуры бактериальных сообществ, выделенные из ферментированных отходов животноводства. Культуры метаногенных бактерий получили путем серии пересевов на жидкую и твердую питательные среды с добавлением амоксициклина. Были идентифицированы представители родов Methanosarcina и Methanosaeta.
Выводы. Полученные культуры являются перспективными для разработки бактериальных препаратов и их последующего использования в биогазовых технологиях.
Ключевые слова: анаэробные мезофильные бактериальные сообщества; метанпродуцирующие бактерии; Methanosarcina; Methanosaeta.
Получение оксицеллюлозы из хлопковых волокон действием различных окислителей /В.А. Барбаш, Ю.Я. Никитюк, И.М. Дейкун - К.: Научные вести НТУУ "КПИ". 2016, № 3. С.
Проблематика. Разработка технологий производства различных по назначению материалов из альтернативных нефти и газу природных источников сырья, в частности из целлюлозы.
Цель исследования. Определение оптимальных значений технологических параметров процесса окисления хлопковых волокон действием различных окислителей – пероксида водорода, Оксона, PINO – на показатели качества оксицелюлозы.
Методика реализации. Окисление механически измельченных хлопковых волокон растворами пероксида водорода, Оксона и PINO проводили с барботированием воздуха при помощи компрессора через раствор целлюлозы в круголодонной колбе, погруженной в водяную баню необходимой температуры. Для определения оптимальных параметров процесса использовали методы планирования эксперимента и оптимизации.
Результаты исследования. Исследованные окислители для получения оксицеллюлозы из хлопковых волокон по увеличению эффективности располагаются в следующий ряд: пероксид водорода – Оксон – PINO. Методом полного факторного эксперимента определены уравнения регрессии, адекватно описывающие процесс получения оксицеллюлозы из волокон хлопка действием Оксона и PINO, а с помощью метода Гаусса–Зейделя – оптимальные значения технологических параметров процесса получения оксицеллюлозы. Показано, что проведение процесса окисления хлопковых волокон по оптимальным значениям технологических параметров позволяет получить оксицеллюлозу с содержанием карбоксильных групп до 3 %.
Выводы. Полученная оксицеллюлоза может использоваться в медицине как один из компонентов нетоксичных, кровоостанавливающих, антимикробных материалов.
Ключевые слова: хлопковое волокно; пероксид водорода; Оксон; PINO; оксицеллюлоза; карбоксильная группа.
Сорбционное концентрирование следовых количеств хлорамфеникола на поверхности силикагеля, модифицированного октадецильнимы группами /О.М. Иванова, Т.В. Сиколенко - К.: Научные вести НТУУ "КПИ". 2016, № 3. С.
Проблематика. Хлорамфеникол (ХЛ) – антибиотик широкого спектра действия, используется в различных отраслях ветеринарии и может накапливаться в продуктах питания животного происхождения. Поэтому предельно допустимая концентрация ХЛ в продуктах питания существенно ограничена в странах ЕС и США. Часто современные методы анализа не позволяют определять следовые количества препарата из различных матриц без предварительного концентрирования. Метод жидкостно-жидкостной экстракции (ЖЖЭ) может сопровождаться потерей целевого компонента. Поэтому целесообразно использовать твердофазовую экстракцию аналита для повышения чувствительности определения инструментальными методами и обеспечения стабильности извлечения ХЛ.
Цель исследования. Разработка методики сорбционного концентрирования ХЛ из проб меда с его последующим детектированием с помощью иммуноферментного метода.
Методика реализации. Использовали набор реагентов для определения ХЛ иммуноферментным методом “Хлорамфеникол ИФА” производства ООО “ХЕМА”. Для разработки методики твердофазового экстрагирования ХЛ из проб меда использовали картриджи, заполненные силикагелем (SiO2-C18) с привитыми октадецильнимы группами производства фирмы “Agilent”. Апробацию методики проводили на образцах меда, которые были предварительно исследованы на наличие ХЛ по стандартной процедуре ЖЖЭ аналита.
Результаты исследования. Исследована возможность проведения сорбционного концентрирования ХЛ на поверхности силикагеля с привитыми октадецильнимы группами. Установлены оптимальные условия извлечения аналита на поверхности сорбента и исследованы условия десорбции ХЛ с поверхности силикагеля. Методика твердофазового экстрагирования ХЛ из матриц меда проверена на контрольных материалах – образцах меда с известной концентрацией ХЛ, приобретенных ООО “ХЕМА” для проведения референсных исследований.
Выводы. Для извлечения ХЛ из матриц меда целесообразно использовать метод твердофазовой экстракции. Предложенный нами метод пробоподготовки позволяет сократить время пробоподготовки образцов меда и является перспективным для разработки метода одновременного концентрирования антибиотиков различных групп для иммуноферментного исследования.
Ключевые слова: хлорамфеникол; твердофазовая экстракция; мед; сорбционное концентрирование; иммуноферментный анализ.
Сорбционное концентрирование следовых количеств хлорамфеникола на поверхности силикагеля, модифицированного октадецильнимы группами /О.М. Иванова, Т.В. Сиколенко - К.: Научные вести НТУУ "КПИ". 2016, № 3. С.
Проблематика. Хлорамфеникол (ХЛ) – антибиотик широкого спектра действия, используется в различных отраслях ветеринарии и может накапливаться в продуктах питания животного происхождения. Поэтому предельно допустимая концентрация ХЛ в продуктах питания существенно ограничена в странах ЕС и США. Часто современные методы анализа не позволяют определять следовые количества препарата из различных матриц без предварительного концентрирования. Метод жидкостно-жидкостной экстракции (ЖЖЭ) может сопровождаться потерей целевого компонента. Поэтому целесообразно использовать твердофазовую экстракцию аналита для повышения чувствительности определения инструментальными методами и обеспечения стабильности извлечения ХЛ.
Цель исследования. Разработка методики сорбционного концентрирования ХЛ из проб меда с его последующим детектированием с помощью иммуноферментного метода.
Методика реализации. Использовали набор реагентов для определения ХЛ иммуноферментным методом “Хлорамфеникол ИФА” производства ООО “ХЕМА”. Для разработки методики твердофазового экстрагирования ХЛ из проб меда использовали картриджи, заполненные силикагелем (SiO2-C18) с привитыми октадецильнимы группами производства фирмы “Agilent”. Апробацию методики проводили на образцах меда, которые были предварительно исследованы на наличие ХЛ по стандартной процедуре ЖЖЭ аналита.
Результаты исследования. Исследована возможность проведения сорбционного концентрирования ХЛ на поверхности силикагеля с привитыми октадецильнимы группами. Установлены оптимальные условия извлечения аналита на поверхности сорбента и исследованы условия десорбции ХЛ с поверхности силикагеля. Методика твердофазового экстрагирования ХЛ из матриц меда проверена на контрольных материалах – образцах меда с известной концентрацией ХЛ, приобретенных ООО “ХЕМА” для проведения референсных исследований.
Выводы. Для извлечения ХЛ из матриц меда целесообразно использовать метод твердофазовой экстракции. Предложенный нами метод пробоподготовки позволяет сократить время пробоподготовки образцов меда и является перспективным для разработки метода одновременного концентрирования антибиотиков различных групп для иммуноферментного исследования.
Ключевые слова: хлорамфеникол; твердофазовая экстракция; мед; сорбционное концентрирование; иммуноферментный анализ.